Cell stem cell:华人科学家发现提高CRISPR-CAS9效率的小分子化合物
2015-02-13 佚名 生物谷
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近日,来自Gladstone研究所的科学家们在著名国际期刊cell stem cell发表了一项最新研究成果,他们通过高通量小分子化合物筛选,鉴定出几种小分子化合物能够提高CRISPR-CAS9系统的基因组编辑效率。这项研究不仅找到了一种提高CRISPR-CAS9效率的方法,同时首次证明了小分子化合物可以成功的调控基因组工程。
研究人员指出,细菌的CRISPR-CAS9系统利用非同源末端连接(NHEJ)的原理进行特异性基因敲除,已经作为一种基因编辑工具得到广泛应用,但其仍存在敲除效率不高和脱靶等问题。研究人员通过一种基于报告基因的筛选方法进行小分子化合物的高通量筛选,试图找到能够通过同源指导修复调节CRISPR-CAS9系统对基因组进行精准编辑的小分子化合物。
利用这种筛选方法,研究人员鉴定出能够提高CRISPR介导的HDR效率的小分子化合物,并且发现在这些小分子化合物存在的情况下,能提高3倍大片段插入效率和9倍点突变效率。研究人员还发现一种小分子化合物能够抑制HDR,同时增强NHEJ介导的移码插入和删除。这些鉴定出来的小分子化合物能够以最小的毒性在多种细胞类型中发挥作用。使用小分子化合物提供了一种简单有效的方法,促进基因组的精准编辑,同时促进了对哺乳动物细胞DNA修复机制的研究。
综上所述,研究人员通过高通量筛选发现了几种小分子化合物能够提高CRISPR-CAS9的基因编辑效率,利用这种方法可以简单有效地对基因组进行精准编辑。这项研究对推广CRISPR-CAS9系统在基因工程方面的应用具有重要意义。
原始出处
Yu C1, Liu Y2, Ma T1, Liu K1, Xu S1, Zhang Y1, Liu H3, La Russa M4, Xie M1, Ding S5, Qi LS6.Small Molecules Enhance CRISPR Genome Editing in Pluripotent Stem Cells.Cell Stem Cell. 2015 Feb 5
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