【期刊导读】预测聚乙二醇干扰素α治疗应答的潜在生物标志物：CXCR4_rs28367495

编者按

近年来，关于单核苷酸多态性（SNP）与聚乙二醇干扰素α（PegIFNα）的治疗应答密切相关的证据越来越丰富，已有研究证实TRIM22 SNP rs10838543 CC基因型，以及SNP rs7519753-C等位基因能较好预测PegIFNα的治疗应答；南方医科大学南方医院的蒋德科教授团队也证实，TRIM26_rs116806878及BST2_rs9576均是预测PegIFNα治疗应答的潜在生物标志物。

近期，侯金林教授同蒋德科教授团队再次发表相关研究，共筛选出22个趋化因子受体4 （CXCR4）相关的SNPs，其中携带CXCR4_rs28367495 CC等位基因的HBeAg阳性慢乙肝患者经PegIFNα治疗后，其联合应答（CR）率更高，HBsAg水平更低，HBsAg降幅更大。研究同时还发现结合CXCR4_rs28367495与另外5个SNPs（既往已报道的可预测PegIFNα治疗应答的预测因子）的多基因评分（PGS）能更好地预测PegIFNα的治疗应答。

研究方法

一项回顾性队列研究，纳入945例HBeAg阳性慢乙肝患者，所有患者均接受PegIFNα治疗至少48周，随访24周。分为两个独立队列，队列1纳入2010年4月至10月全国11家医院的238例慢乙肝患者，队列2纳入2013年1月至2015年8月全国43家医院或临床中心的707例慢乙肝患者。纳入标准：年龄18 - 65岁、HBsAg阳性至少6个月、HBeAg阳性、HBV DNA > 10⁵ copies/mL、2 ≤ ALT < 10 × 正常值上限（ULN）、入组时无肝硬化、6个月内未接受过抗病毒治疗。

主要疗效终点为HBeAg血清学转换、平均HBV DNA水平、HBV DNA降幅、联合应答（CR）率、HBsAg水平及HBsAg降幅。联合应答（CR）定义为HBeAg血清学转换且HBV DNA < 3.3 log₁₀ IU/mL。

患者特征

在队列1和队列2中，超70%为男性患者，平均年龄约29岁，HBV基因型为B/C型的患者比例分别为99.2%和96.2%，汉族分别占98.7%和92.9%，为排除遗传因素的影响，后续仅分析汉族患者。两组患者的HBV DNA水平相似（P = 0.135）；但队列1的HBsAg水平和HBeAg水平均显著低于队列2（P 均< 0.001），ALT水平显著高于队列2（P = 0.029）。在两个队列中，与PegIFNα治疗应答相关的5个SNPs（STAT4_rs7574865、CFB_rs12614、GNLY_rs11127、CD55_ rs28371597和TRIM26_rs116806878）的分布相似（P 均> 0.05）。

接受PegIFNα治疗的中国HBeAg阳性乙肝患者的临床特征

研究结果

一.CXCR4_rs28367495 CC等位基因能更好预测HBeAg阳性慢乙肝患者对PegIFNα的治疗应答

本研究共筛选出22个CXCR4相关的标签SNPs（tag SNPs），进一步分析发现CXCR4_rs28367495的C等位基因与PegIFNα的治疗应答显著相关。随着rs28367495 C等位基因的增加（TT, 0; CT, 1; CC, 2），慢乙肝患者的HBeAg血清学转换率不断升高，平均HBV DNA水平逐渐下降，HBV DNA降幅逐渐升高，随着治疗时间和随访时间的延长，相关差异更为显著。

1 携带CXCR4_rs28367495 CC等位基因的患者经PegIFNα治疗后的HBeAg血清学转换率及HBV DNA降幅显著更高

例如在队列1+2中，与TT基因型和CT基因型患者相比，CC基因型患者经PegIFNα治疗后，第72周时的HBeAg血清学转换率（P = 0.001，图1 C）及HBV DNA降幅显著升高（P = 0.007，图1 I），平均HBV DNA水平显著降低（P = 0.002，图1 F）。

图1 在队列1+2中，HBeAg阳性慢乙肝患者经PegIFNα治疗后各时间点时，CXCR4_rs28367495的各基因型与HBeAg血清学转换率（C）、HBV DNA水平（F）和HBV DNA降幅（I）的关系比较

2 携带CXCR4_rs28367495 CC等位基因的患者PegIFNα治疗后的综合应答率显著更高

CXCR4_rs28367495 的C等位基因越多的患者（CC基因型 vs. CT基因型 vs. TT基因型）在72周时的CR率显著更高：队列1（36.4% vs. 33.3% vs. 17.5%; P = 0.008）、队列2（32.4% vs. 23.2% vs. 16.1%; P = 0.004）和队列1+2（33.3% vs. 25.7% vs. 16.5%; P = 1.51 × 10^-4）（图2 A-C）。多因素logistic回归分析证实，CXCR4_rs28367495与各队列72周时的CR率显著相关（各队列的P 均< 0.05）。

图2 队列1（A）、队列2（B）和队列1+2（C）慢乙肝患者经PegIFNα治疗后各时间点，CXCR4_rs28367495的各基因型（TT、CT、CC）与联合应答率的关系比较

3 携带CXCR4_rs28367495 CC等位基因的患者经PegIFNα治疗后的HBsAg降幅更高

评估CXCR4_rs28367495与HBsAg水平和HBsAg降幅的关系时发现，在队列2和队列1+2中，与TT或CT基因型患者相比，CC基因型患者在PegIFNα治疗后的第24周、48周和72周时的平均HBsAg水平显著更低（P 均< 0.05），HBsAg降幅显著更高（P 均< 0.05）（图2 D-I）。多因素logistic回归分析表明，在队列1+2中CXCR4_rs28367495基因型与患者经PegIFNα治疗后72周时的平均HBsAg水平（P = 0.003）和HBsAg降幅（P = 0.003）呈显著正相关。

图2 D-I 各队列慢乙肝患者经PegIFNα治疗后各时间点时，CXCR4_rs28367495的各基因型（TT、CT、CC）与HBsAg水平（D-F）及HBsAg降幅（G-I）的关系比较

二.构建的多基因评分（PGS）能更准确地预测PegIFNα的治疗应答

1 PGS值越大，患者经PegIFNα治疗后的HBeAg血清学转换率及HBV DNA降幅越高

既往研究证实，STAT4_rs7574865、CFB_rs12614、GNLY_rs11127、CD55_rs28371597、TRIM26_rs116806878这5个SNPs均可预测PegIFNα的治疗应答，本研究在此基础上还纳入了CXCR4_rs28367495，构建了新的PGS模型，以期更好地预测HBeAg阳性慢乙肝患者对PegIFNα的治疗应答。

结果发现患者的PGS值越大，患者对PegIFNα的治疗应答率越高，尤其是在较长时间的治疗和随访中。例如，各队列中PGS值较高的患者在72周时的HBeAg血清转换率显著更高（P 均< 0.05; 图3 A-C），HBV DNA水平显著更低（P 均< 0.05; 图3 D-F），HBV DNA降幅显著更大（P 均< 0.05; 图3 G-I）。

图3 各队列中，PGS值与HBeAg阳性慢乙肝患者经PegIFNα治疗后的HBeAg血清学转换率（A-C）、HBV DNA水平（D-F）及HBV DNA降幅（G-I）的关系

2 PGS值越大，患者经PegIFNα治疗后的CR率越高

在72周时，随着PGS值的升高（1→8），各队列患者的CR率不断提高（图4 A-C）：

• 队列1（0.0%、3.8%、13.7%、23.2%、36.5%、30.4%、66.7%和100.0%；P = 3.45 × 10^-6）；

• 队列2（0.0%、9.8%、11.2%、17.6%、29.7%、31.0%、40.0%和100.0%；P = 8.21 × 10^-9）；

• 队列1+2 （0.0%、7.8%、11.8%、18.8%、31.6%、30.9%、47.6%和100.0%；P = 1.26 × 10^-13）。

多因素logistic回归分析表明，在各队列中，PGS值均与PegIFNα治疗后72周时的CR率显著相关（各队列P 均< 0.05）。

图4 A-C 各队列中，PGS与HBeAg阳性慢乙肝患者经PegIFNα治疗后CR的关系

3 PGS值越大，患者经PegIFNα治疗后的HBsAg降幅越大

患者的PGS值越高，平均HBsAg水平越低（图4 D-F），HBsAg降幅越大（图4 G-I）。例如，在队列1+2中，PGS值为1→8时，患者在第72周时的HBsAg水平显著降低 (P = 4.90 × 10^-4；图3 F)，HBsAg降幅显著增加（P = 0.005；图4 I）。多因素logistic回归分析表明，在队列1+2中，PGS值与HBsAg水平和HBsAg降幅均呈显著正相关（P = 0.004）。

图4 各队列中，PGS值与HBeAg阳性慢乙肝患者经PegIFNα治疗后的HBsAg水平（D-F）及HBsAg降幅（G-I）的关系

三.ROC分析：CXCR4_rs28367495及PGS模型均能较好预测PegIFNα的治疗应答

通过ROC分析评估所有变量预测PegIFNα治疗应答的能力，结果显示在单个预测因子中，与年龄、HBV基因型和ALT相比，CXCR4_rs28367495及PGS的受试者工作特征曲线下面积（AUC）均更大。此外，整合模型的预测性能最佳，其AUC为0.724（图5）。

图5 预测变量与整合模型预测HBeAg阳性慢乙肝患者对PegIFNα治疗应答的AUROC

肝霖君有话说

CXCR4是一种α趋化因子受体，可通过不同的途径激活多种生物学过程，包括多种细胞功能及生理和免疫过程。本研究回顾性分析发现携带CXCR4_rs28367495 CC基因型的慢乙肝患者对PegIFNα治疗应答更好，该SNP或可成为预测PegIFNα治疗应答的预测指标。

目前已有多个PGS模型用于预测PegIFNα治疗HBeAg阳性慢乙肝患者的疗效，本研究通过整合6个SNPs（包括本研究新发现的CXCR4_rs28367495以及5个既往证实可预测PegIFNα治疗应答的SNPs）构建了一个新的PGS模型，该模型能更好地预测PegIFNα的治疗应答，这也为PegIFNα的治疗策略优化提供了新的方向，当然相关研究在未来仍需要进一步的探索。

参考文献：  

Luo M, Dong C, Liang X, et al. A genetic variant of CXCR4 predicts pegylated interferon-alpha treatment response in HBeAg-positive chronic hepatitis B patients[J]. J Clin Microbiol. 2024, 62(2): e0139623.